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龙图腾网获悉南京工业大学申请的专利一种提高脂肪酶热稳定性的分子改造设计方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119028421B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410720584.3，技术领域涉及：G16B5/00；该发明授权一种提高脂肪酶热稳定性的分子改造设计方法是由胡燚;种温雅;张子晗;年彬彬设计研发完成，并于2024-06-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种提高脂肪酶热稳定性的分子改造设计方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种提高脂肪酶热稳定性的理性设计方法，属于酶工程领域。通过分子动力学模拟初步确定待改造脂肪酶的柔性区域，经过结构分析来确定改造区域，再经多种计算工具综合衡量来确定改造位点，采用NNK简并密码子进行定点饱和突变来建立突变体文库，再采用基于分光光度法的微孔板筛选方法筛选出热稳定性提高的优异突变体。本发明的南极假丝酵母脂肪酶B突变体在50℃下的半衰期较野生型提高了9倍，同时比酶活也较野生型提升了6.32％。本发明突破了“稳定性活性的权衡”，实现了脂肪酶热稳定性的改善，这有利于脂肪酶突变体在食品、药品或生物柴油等领域的工业应用中发挥重要作用。

本发明授权一种提高脂肪酶热稳定性的分子改造设计方法在权利要求书中公布了：1.一种提高脂肪酶热稳定性的分子改造设计方法，其特征在于，包括以下步骤： 1选择南极假丝酵母来源的脂肪酶B作为改造对象；从蛋白质数据库PDB中获得待改造脂肪酶的晶体结构和氨基酸序列； 2使用AMBER18软件进一步对上述结构进行MD模拟，通过MD模拟得到的均方根波动值，将波动最大的区域认定为柔性区域，并结合待改造脂肪酶的结构，确定改造的靶标区域； 3对步骤2中确定的靶标区域，结合FireProtWeb与FoldX的热稳定预测结果，初步确定结合能∆∆Gfold0潜在靶标位点；综合ConSurf保守性分析结果与B-factor值，从中选取保守性得分5且具有高B因子前50%的位点，作为最终靶标位点； 4对步骤3中确定的潜在靶标位点，采用NNK简并密码子设计引物，进行定点饱和突变，并进行重组表达，采用对硝基苯酚法对改造的脂肪酶进行热稳定性测定，筛选热稳定性提高的单突变体； 5对步骤4中筛选出的单突变体，利用FoldX进行虚拟筛选重组，选取更有潜力的虚拟多重突变体； 6对步骤5筛选出的虚拟多重突变体，进行重组表达并纯化获得改造的脂肪酶，采用对硝基苯酚法对改造的脂肪酶进行热稳定性测定，筛选热稳定性提升最高的单突变体； 南极假丝酵母脂肪酶B突变体M1的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示，其核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。

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