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龙图腾网获悉江苏中慧元通生物科技股份有限公司;易慧生物技术(上海)有限公司申请的专利一种肺炎球菌单价多糖的纯化工艺获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120607643B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511022566.9，技术领域涉及：C08B37/00；该发明授权一种肺炎球菌单价多糖的纯化工艺是由安有才;贾春玉;史长军;宗娟设计研发完成，并于2025-07-24向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种肺炎球菌单价多糖的纯化工艺在说明书摘要公布了：本发明公开了一种肺炎球菌单价多糖的纯化工艺，具体涉及生物医药技术领域。所述工艺包括前处理、阴离子层析、复合层析和仿生配基层析。本发明的纯化工艺，先利用酸沉工艺出去30％的蛋白和核酸，接着采用阴离子层析进行粗提，除去80％以上的蛋白和核酸，且阴离子层析粗提，可以处理大体积的料液；接着利用复合层析精纯，去除残留蛋白、核酸和内毒素，高载量进一步浓缩多糖；最后利用仿生配基层析，深度除杂，靶向清除痕量的核酸，最终得到单一多糖回收率在90％以上，蛋白含量低于0.1％，核酸含量低于0.1％，内毒素含量低于0.1EUmL，去除率达到99％以上。

本发明授权一种肺炎球菌单价多糖的纯化工艺在权利要求书中公布了：1.一种肺炎球菌单价多糖的纯化工艺，其特征在于，所述工艺包括： 步骤一，前处理 将肺炎球菌单一多糖，进行离心去除菌体，采用超滤浓缩工艺对料液进行浓缩，采用酸沉工艺初步去除包括部分蛋白质、部分核酸的杂质，采用超滤系统对酸沉离心液进行预处理至层析平衡体系PBS中，得到预处理的粗提液； 步骤二，阴离子层析 将预处理后的粗提液过阴离子层析柱，以流穿模式收集料液，得到DEAE流穿液，切换至低电导Tris缓冲体系进行超滤换液，得到DEAE处理液； 所述阴离子层析填料选用高分辨率型弱阴离子吸附填料，DEAEBestroseHP； 所述流穿模式的程序为： 平衡：以0.1-0.3M的PBS，pH=7.0-7.4，平衡阴离子层析柱，流速120-180cmh，体积5CV； 上样：将预处理粗提液流速120-180cmh，体积15CV，UV206≥300mAU收集； 清洗：以0.1-0.3M的PBS，pH=7.0-7.4，清洗阴离子层析柱，流速120-180cmh，体积3CV； 再生：1-3M的NaCl溶液，流速100cmh，体积2CV，UV280归零； 步骤三，复合层析 将DEAE处理液，上样复合层析后，通过洗杂和梯度洗脱，收集得到Capto洗脱液； 具体操作为： 填料：CaptoQImpRes； 平衡：以20mM的的Tris-HCl，pH=7.4，平衡复合层析柱，流速60cmh，体积5CV； 上样：将DEAE处理液流速30cmh，体积至60mg多糖mL填料，UV280基线； 洗杂：使用20mM的Tris-HCl，流速60cmh，体积2CV，UV26050mAU； 梯度洗脱：0→0.3MNaCl，线性斜率为0.03MCV，流速30cmh，体积10CV，收集0.15-0.25MNaCl区间，得到Capto洗脱液； 再生：1M的NaCl溶液，流速100cmh，体积2CV，UV280归零，0.1MNaOH； 稀释：将CaptoQ洗脱液用超纯水稀释3倍，使电导≤3mScm，得到稀释液； 步骤四，仿生配基层析 将Capto洗脱液用超纯水稀释后，降低电导，上仿生配基层析，流穿模式收集洗脱液后，经超滤浓缩、除菌过滤保存； 所述流穿模式收集包括平衡、上样、洗脱收集； 其中，所述平衡采用5CV平衡缓冲液20mMTris-HCl平衡层析柱；若是血清型23F型还需要在平衡液中加入0.1mMZnCl2溶液；上样速度为10cmh； 所述仿生配基层析的填料选用仿生配基填料，所述仿生配基填料是由血清型配体与沉降凝胶制备而成；所述沉降凝胶先经过环氧基活化后得到的活化凝胶，再与血清型配体制备得到仿生配基填料；所述血清型配体具体为：血清型1、2、3、4、5、6A、7F、8、9V、9N、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、20、22F、33F配体如H2N-Gly-Arg-Trp-Pro-Ser-Lys-Thr-Tyr-COOH所示，血清型6B配体如H2N-Gly-Cit-Trp-Ser-Ser-Tyr-COOH所示；血清型19F配体如H2N-Arg-Trp-His-Gly-Ser-Tyr-NH2所示；血清型23F配体如H2N-Arg-Trp-His-Gly-Ser-Tyr-COOH所示； 所述填料具体制备方法为： 清洗：取100mL沉降凝胶，用超纯水冲洗3次，5倍柱体积次，真空抽滤至含水量≤5%；浸没于20%乙醇中，4℃保存备用； 环氧基活化：取100mL沉降凝胶加入200mL1,4-丁二醇二缩水甘油醚，活化剂中溶解有0.2M的NaOH，25℃，150rpm恒温振荡，反应4小时，反应后以此用超纯水、0.1M乙酸，pH=4.0和20%乙醇各5CV进行冲洗，得到活化凝胶； 多肽溶液：血清型配体2mgmL，溶于0.1M碳酸盐缓冲液，pH8.5； 将活化凝胶抽干，加入两倍的凝胶沉降体积的多肽溶液，通氮气排氧，密封后40℃振荡反应，维持pH8.5±0.2，加入1M乙醇胺，pH=9.0,25℃振荡2小时；依次用6M尿素5CV、0.1M乙酸5CV和20%乙醇5CV清洗，即得仿生配基填料。

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