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龙图腾网获悉南开大学申请的专利一种超分辨大深度三维扫描光片显微镜的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN121253497B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511802548.2，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种超分辨大深度三维扫描光片显微镜的方法是由詹亦飞;叶青;田建国设计研发完成，并于2025-12-03向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种超分辨大深度三维扫描光片显微镜的方法在说明书摘要公布了：本发明公开一种超分辨大深度三维扫描光片显微镜的方法，属于荧光成像技术领域，本发明将激发光经过柱透镜处理，利用生成的初始光片的二次汇聚，获得更长的激发物镜工作距离，从而减少激发物镜和样品之间的空间冲突；其次将收集物镜以较小倾斜角度放置，并搭配一个具有相同倾斜角度的具有光学窗口的液体室，这一配置决定了收集物镜的成像深度；然后选择与组织透明化样品折射率相匹配的收集物镜和成像缓冲溶液，这一配置能够避免光学像差实现高分辨成像。通过本发明可以实现高分辨成像和深度成像兼顾，同时所能成像的横向范围也较现有技术提高，为生物科学和临床医学的研究提供有力的支持。

本发明授权一种超分辨大深度三维扫描光片显微镜的方法在权利要求书中公布了：1.一种超分辨大深度三维扫描光片显微镜的方法，其特征在于：包括以下步骤： S1、二次汇聚激发光片生成： 激发激光束通过柱透镜作用在激发物镜背焦面之前汇聚，经过激发物镜形成的汇聚光束在激发物镜的焦平面将生成一次光片，同时，在焦平面外生成二次汇聚激发光片； S2、收集物镜的光路设置： 将收集物镜以小倾斜角度放置，并搭配一个光学透明且具有相同倾斜角度的液体室，使得激发光平面能够与收集物镜的成像平面重合； S3、样品透明化处理： 待观察的样品经过组织透明化处理，实现折射率统一达到光学透明化； S4、三维扫描成像执行： 选择与透明化的样品折射率匹配的成像缓冲溶液和收集物镜，将样品放入液体室内，注入成像缓冲溶液，二次汇聚激发光片对样品进行面激发，收集物镜同时收集样品平面发出的荧光信号，控制相机和位移台运行，实现对样品的高分辨大深度三维扫描成像； S5、图像数据处理： 将步骤S4采集得到的图像数据经过图像数据处理，得到三维重建图像和高分辨的样品单张图像； 在步骤S1中，所述二次汇聚激发光片的激发距离为：20~100mm； 在步骤S2中，所述小倾斜角度为：5°~30°； 在步骤S5中，所述高分辨的样品单张图像的分辨率为：100~300nm。

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