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  • 本发明公开了一种可控的移除外源载体骨架和筛选标记的方法。该方法设计一种新型转化载体序列,含有非自主型转座子和目标基因组成的分离表达盒序列,通过将该分离表达盒插入玉米籽粒紫色糊粉层标记基因序列形成目标基因表达盒转座检测系统,同时利用籽粒糊粉层...
  • 本发明公开了一种真核蛋白表达与纯化系统及其构建方法和应用,属于生物技术领域。本发明的真核蛋白表达与纯化系统包括表达载体和真核宿主细胞;该表达载体中含有定位肽、ELK16聚集标签和连接肽。该系统通过定位肽实现蛋白进入内质网路径;同时利用ELK...
  • 本发明公开了一种构建酿酒酵母表面展示系统的方法及其应用,属于合成生物学和基因工程领域。该系统以CEN.PK.2‑1C为底盘菌株,敲除PEP4、PRB1和CAN1基因构建菌株LZy10,选用28_YI作为GPI锚定蛋白,构建CEN‑Displ...
  • 本发明公开了铜离子诱导型表达系统在Pichia kudriavzevii酵母中的构建与应用。具体来说,本发明公开了一种在Pichia kudriavzevii酵母中可诱导表达目的蛋白的策略。本发明提供的铜离子诱导型表达系统能够有效调控外源或...
  • 本发明涉及一种基于麦芽糖的枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统及其应用,属于基因工程领域。枯草芽孢杆菌中常用的诱导系统存在需要外源添加、操作繁琐、成本较高、表达强度低等问题,不利于蛋白和代谢产物的高效表达和工业化。本发明通过对PmalA启动子进行...
  • 本发明涉及枯草芽孢杆菌168菌株中转录因子失活库的建立方法及其应用。通过CRISPR‑dCas9‑AID介导的高通量自动化枯草芽孢杆菌基因组碱基编辑方法,对枯草芽孢杆菌168菌株中目标基因进行高效编辑,来建立全基因组范围的转录因子失活库,可...
  • 本发明公开了一种产乙醇和乙酸的产乙醇梭菌工程菌株及其构建方法和应用,属于合成生物学与代谢工程领域。本发明针对产乙醇梭菌在合成气发酵过程中能量代谢受限、生长缓慢及产物产率低的技术问题,采用推‑拉‑阻协同的代谢重编程策略:首先敲除副产物合成基因...
  • 本发明公开了一种在东方拟无枝酸菌中进行基因编辑的方法包括如下步骤:(1)构建用于敲除后DNA修复的目的基因nrps8序列的上下游同源臂片段nrps8‑arm‑A和nrps8‑arm‑Z;(2)构建可编码sgRNA的DNA重组片段gDNA‑n...
  • 本发明涉及一种在大肠杆菌中异源共表达的工程化细胞及其构建方法,属于微生物技术领域;所述构建方法包括以下步骤:(1)构建融合基因;(2)进行大肠杆菌偏好性密码子优化;(3)构建重组质粒pET‑28a‑EHb和pET‑28a‑EMb;(4)通过...
  • 本发明公开了基于pL启动子nut位点缺失的温控裂解质粒及其构建方法和应用。本发明在维持λcI857‑pL/pR温控调控方式不变的前提下,提高了系统在中高温培养条件下的稳定性;同时,与通过启动子突变实现热稳定性的其他系统相比,本发明通过对启动...
  • 本发明涉及用于防止在细菌中重组蛋白质的生产期间正亮氨酸错误地掺入蛋白质中的方法和组合物。本发明还提供了用于本文提供的方法和组合物的微生物宿主细胞和核酸分子。
  • 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种隐蔽质粒介导的基因工程益生菌及其构建方法和应用。本发明通过高拷贝隐蔽质粒介导外源基因稳定遗传表达,培养过程无需添加抗性,显著提升食品级营养化学品合成的安全性、稳定性与有效性。本发明改造后的菌株可高效利...
  • 本公开涉及一种基于突变改造提高阿拉伯呋喃糖苷酶活性的方法及应用。具体地,涉及一种提高阿拉伯呋喃糖苷酶活性的方法、一种具有阿拉伯呋喃糖苷酶活性的蛋白,编码该蛋白的基因、插入有该基因的重组载体、转化有该基因的转化体、制备阿拉伯呋喃糖苷酶的方法及...
  • 本发明公开一种用于制备目标DNA的系统、表达载体组合物及其应用,涉及生物技术领域。所述用于基因编辑的系统包括:噬菌体激活蛋白;以及DRT2系统或重组DRT2系统;噬菌体激活蛋白包括单链DNA退火蛋白、单链DNA结合蛋白和核糖核苷酸还原酶中的...
  • 本发明公开了一种tGmR细菌传感器的制备方法及其产品和应用,tGmR细菌传感器含有重组质粒pET‑mphR‑tetR‑mphA‑tetM。本发明生物传感器可实现对化学污染物的实时、低成本和生物相关检测;具有更好的遗传稳定性;通过引入抗性基因...
  • 本发明涉及一种用于治疗中枢神经疾病的工程化细胞外囊泡及其制备方法和应用。具体地,本发明提供这一种表达盒,所述表达盒具有式I结构,以及含有该表达盒的载体、宿主细胞,以及利用该细胞产生的细胞外囊泡。本发明提供的工程化的细胞外囊泡富含治疗性蛋白以...
  • 本发明提供了一种融合基因及HPV核酸疫苗。本发明经过研究和优化获得了一种融合基因,所述融合基因通过将HPV 16型的L1基因,HPV 16型的E5基因、E6基因和E7基因,HPV 52型的E5基因、E6基因和E7基因依次连接获得。发明人发现...
  • 本发明提供一种一步层析快速制备重组芋螺肽的方法以及应用。本发明将毕赤酵母系统重组表达的芋螺肽的发酵液经粗纯后,仅仅通过一步阳离子层析的方法即完成了对酶切后的芋螺肽的精纯,获得纯度达98%以上的高纯度芋螺肽。本发明进一步发现,利用毕赤酵母表达...
  • 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶基因及其应用。涉及酶工程技术领域。包括β‑葡萄糖苷酶的基因、氨基酸序列及其应用。本发明获得重组酶B0‑BG30最适温度为40℃,最适pH为5.6,在35℃孵育2小时后活性保持100%;在pH 5.0‑10.0孵...
  • 本发明公开了一种柱花草紫色酸性磷酸酶基因SgPAP27b在提高植物耐酸铝胁迫能力中的应用,所述SgPAP27b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO : 1所示。该基因具有提升植物耐酸铝胁迫能力的生物学功能;本发明实验证实,异源表达SgPAP...
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