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  • 本申请涉及一种提高腺相关病毒AAV感染细胞的感染效率的方法,其包括以下步骤:使待感染的所述细胞与DNA复制抑制剂接触,其中所述DNA复制抑制剂包括细胞周期非特异性药物和/或CDK抑制剂。本申请所述的方法可以显著提高腺相关病毒AAV感染细胞的...
  • 本申请公开了一种敲低ATXN3基因表达的CRISPR/Cas9基因编辑系统及其在制备治疗脊髓小脑共济失调3型药物中的应用,该编辑系统包括mATXN3‑SgRNA1和mATXN3‑SgRNA2,或hATXN3‑SgRNA1和hATXN3‑Sg...
  • 本发明公开了一种高效生产通用型CAR‑T的方法。具体地,本发明提供了一种高效生产通用型CAR‑T的方法,包括步骤:(s1)提供待编辑的T细胞,并对所述T细胞进行激活培养,从而得到激活的T细胞;(s2)基因导入,所述基因导入包括使用整合了CA...
  • 本发明涉及基因编辑技术领域,公开了一种基于双色荧光蛋白的基因编辑效率检测载体及其构建方法与应用。构建方法如下:合成包含特异性靶向序列、mCherry报告基因以及C端融合的PEST降解肽序列的全长DNA片段;双酶切、纯化得到目的片段;将目的片...
  • 本发明属于基因工程技术领域,针对现有siRNA技术作用短暂、敲低效率低及脱靶率高的问题,公开了一种靶向ZDHHC5基因的质粒。该质粒包含表达shRNA的DNA序列,优选SEQ ID NO : 1位点,采用茎环结构“CTCGAG”提升稳定性,...
  • 本发明涉及一种基于外泌体递送大分子至海水鱼类精子的方法、系统和组合物,属于生物技术与生殖工程交叉领域,所述方法利用展示有CD81蛋白的外泌体作为载体,通过所述CD81蛋白与鱼类精子细胞膜上的CD9蛋白的受配体特异性结合,将装载于所述外泌体内...
  • 本发明提供了核酸递送载体、组合物及其制备方法。所述核酸递送载体至少包括以下成分:(a)低共熔溶剂;(b)脂质分子。所述组合物包括上述核酸递送载体、核酸类药物。本发明所述的组合物可以显著提高药物的稳定性,提高药物递送效率和细胞摄取率,并实现了...
  • 本发明属于肿瘤领域,涉及NRF2在调控砷致细胞恶性增殖中的应用,将恶性增殖细胞的NRF2基因进行瞬时敲低。瞬时敲低NRF2后,抑制G6PD/NADK介导的NADP合成平增多,从而逆转了细胞氧化还原稳态失衡导致的细胞恶性增殖表型。
  • 本发明公开了一种肾小球IgA沉积小鼠模型的构建方法,涉及动物模型开发和肾小球IgA染色技术领域;包括:通过体外转录的方式,获得Cas9 mRNA,guideRNA和donor DNA;将Cas9 mRNA、gRNA和donor DNA显微注...
  • 本发明提供了TMEM65在构建心肌损伤动物模型及制备治疗心肌损伤药物中的应用。通过CRISPR/Cas9技术构建TMEM65心肌细胞特异性敲除小鼠,可以更准确地研究TMEM65基因在心肌细胞中的生理作用。通过观察TMEM65心肌细胞特异性敲...
  • 本发明适用于动物模型构建技术领域,提供了一种基于ZDHHC23基因敲除构建兔生长性状模型的方法,包括以下步骤:SpG‑Cas9 mRNA的转录合成;兔ZDHHC23锌指结构域sgRNA设计合成:在家兔ZDHHC23基因上,针对ZDHHC23...
  • 本发明涉及微生物技术领域,具体是一种高产黄色素的球毛壳菌(Chaetomium globosum)菌株H‑1的培养方法,包括以下步骤:(1)菌株的活化;(2)制备优化培养基,其组成为:葡萄糖 20~30 g/L、鱼蛋白胨 5~9 g/L、磷...
  • 一种利用热水解预处理纤维素类生物质强化厌氧系统发酵效能的方法,通过对纤维素类生物质进行高温高压热水解预处理,有效破坏其致密物理结构,促进纤维素、半纤维素等有机组分的溶出与转化,显著提升后续厌氧消化过程的甲烷产率。该方法通过优化预处理时间、温...
  • 本申请涉及生物发酵领域,具体公开了一种降解秸秆木质纤维素和/或制备沼气的方法,包括以下步骤:1)采集发酵原料,所述发酵原料中包括粪便、秸秆和钙盐,所述粪便、秸秆和钙盐的质量比为(25~30):(30~35):(0.5~3.0);2)向发酵原...
  • 本申请公开了一种糠醛渣免脱毒发酵制备乙醇的方法及应用。该方法包括:S1.对未经任何脱毒预处理的酸性糠醛渣进行高固含量酶解,获得糠醛渣酶解液;S2.对废弃淀粉进行液化和糖化,获得淀粉糖化液;S3.将糠醛渣酶解液和淀粉糖化液按比例混合后,接入运...
  • 本发明涉及一种利用合成气发酵生产正丁醇的发酵方法,基于热醋穆尔氏菌菌株利用合成气进行发酵生产正丁醇,其中,发酵过程中,控制pH5.5‑7.0,氧化还原电位在‑250mV至‑200mV。如此,能够大幅提高正丁醇的发酵产量,使得发酵液中的正丁醇...
  • 本发明公开了一种S,S‑3, 6‑辛二醇及其制备方法,以3, 6‑辛二酮为原料,建立以异丙醇为反应介质的体系,通过辅酶以及酮还原酶进行反应得到具有S,S‑3, 6‑辛二醇的产物;所述制备方法主要包括以下操作步骤:原料的预处理、双酶级联辅酶催...
  • 本发明公开了一种R,R‑2, 3‑丁二醇的制备方法,以2, 3‑丁二酮为原料,通过酮还原酶实现对R,R‑2, 3‑丁二醇的制备;具体包括以下操作步骤:固定化酶的制备、构建温度‑pH双梯度反应体系、构建辅酶再生系统以及产物分离。本发明用于提高...
  • 本发明提供了一种丙酮酸脱羧酶突变体及其应用。具体提供了一种制备式Ⅲ所示的化合物的方法,其包括如下步骤:在缓冲液中,在丙酮酸脱羧酶突变体存在下,将如式I所示化合物和丙酮酸进行如下所示的缩合反应得如式Ⅲ所示的化合物;所述丙酮酸脱羧酶的突变体与如...
  • 本发明公开了一种运用重组酵母甲基化转移酶COQ5及其突变体在体外将牛樟芝粗提物中前体物质定向转化为高价值三萜安卓奎诺尔的方法。该方法以固态发酵或野生子实体为原料,经乙醇提取获得粗浸膏;在油酸‑腺苷甲硫氨酸‑磷酸缓冲体系中,加入野生型或突变型...
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